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DAPI染液

貨號:X12040~X12041
品牌:XYbio
CAS號:28718-90-3
說明書下載:X12040~X12041

產品介紹

訂購信息:


目錄號

產品名稱

規格

售價

X12040

DAPI (5mg/ml) DAPI染液(5mg/ml)

200μl

¥255.00

X12041

DAPI Stain, Ready-to-use 即用型 DAPI染液

10ml

¥194.00


產品說明:


CAS號

28718-90-3

分子式

C16H17Cl2N5·2HCl

分子量

350.25 g/mol

保存

-20℃保存,一年有效

運輸

冰袋運輸


產品描述

DDAPI,也稱DAPI dihydrochloride,是一種常用的核酸染料,可以和雙鏈DNA富含AT序列的小溝結合,產生比自身強20多倍的藍色熒光。和EB(ethidium bromide)相比,DAPI對雙鏈DNA的染色靈敏度要高很多倍。DAPI也可對RNA進行染色,染色機理是其可以選擇性嵌入“AU序列”并發出熒光。相比DAPI-dsDNA(Ex/Em=358 nm/461 nm),DAPI-RNA具有較長的最大發射波長(500 nm),其熒光亮度僅有DAPI-dsDNA的20%。

盡管DAPI不能通過活細胞膜,但可以通過提高濃度使之進入活細胞。DAPI具有很高的光漂白承受水平,能用來檢測酵母線粒體DNA,葉綠體DNA,病毒DNA,Microplasm DNA以及染色體DNA。

DAPI典型的藍色熒光特性使其非常普遍的搭配其他綠色、黃色或紅色熒光染料用于細胞生物學多色熒光標記技術,因此也常作為核酸和染色體的復染劑用于細胞凋亡檢測、RNA原位雜交、直接或間接免疫檢測等領域,其染色后可用熒光顯微鏡觀察或流式細胞儀檢測。

本產品為溶液,分為2種形式,濃度為5 mg/mL和即用型,即用型產品濃度已經過優化,可以滿足各種常規染色的需要。


使用方法

1. 配制工作液:用雙蒸水或PBS稀釋母液,配制成所需要的工作的濃度(0.5-10 μg/mL)?!咀ⅲ杭从眯筒恍枰瞬僮鳌?/span>

2. 固定的細胞或組織染色:

對于固定的細胞或組織樣品,固定后,適當洗滌去除固定劑。DAPI染色通常在其他染色的最后進行。如果不需要進行其它染色,則直接進行DAPI 染色。

a) 對于貼壁細胞或組織切片:加入適量DAPI染色液,覆蓋住樣品即可。

b) 對于懸浮細胞:至少加入待測染色樣品體積3倍的染色液,混勻。室溫放置3-5分鐘。

c) 吸除DAPI染色液,用TBST、PBS或生理鹽水洗滌2-3次,每次3-5分鐘。

d) 直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察。激發波長360 nm,發射波長460 nm。

3. 活細胞或組織染色:
a) 細胞培養物中加入適量DAPI染色液,約1/10細胞培養基體積,必須充分覆蓋住待染色的樣品。通常對于六孔板一個孔需加入1 mL染色液,對于96孔板一個孔需加入100 μL染色液。 

b) 在37℃培養細胞 10~20 分鐘。

c) 用 PBS或合適的緩沖液洗細胞兩次。

d) 直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察。激發波長360 nm,發射波長460 nm。

 

注意事項:

1)DAPI對人體有一定刺激性,請注意適當防護。

2)熒光染料都存在淬滅的問題,建議染色后盡量當天完成檢測。

3)為減緩熒光淬滅可以使用抗熒光淬滅封片液。

4)低濃度的DAPI不容易穿透細胞膜。

5)為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。


本產品僅供科研使用,不可用于臨床診斷應用或其他用途。

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