FITC-Dextran 70 (FD70) FITC標記葡聚糖（70 kDa）

產品描述

FITC標記葡聚糖（FITC-Dextran）是以天然葡聚糖B512F限制水解和分級純化制備的不同分子量葡聚糖為底物，經熒光素標記所得的合成探針。熒光素基團通過一個穩定的硫代氨甲酰鍵連接到葡聚糖上（見附錄圖1. FITC-Dextran分子片段的結構特征），此標記步驟不會引起任何的葡聚糖降解。FITC-Dextran內每個葡萄糖單位含0.002~0.008 mol FITC，這一低水平的替換確保葡聚糖最小的結構變化，這一特性對滲透性研究來說是最基本需求。

FITC標記葡聚糖（FITC-Dextran）廣泛用于微循環和細胞通透性研究，通過熒光顯微測定法來檢測。還可用于植物細胞壁多孔性和毛細血管通透性研究。小分子量的FITC-Dextran也能用來測定比如內吞和細胞連接通透性的生理過程。FITC-Dextran 70 (FD70)可能用作一種模式化合物來開發輸送分子到原生質體的方法，或者用來研究水凝膠和脂質體等結構內的藥物釋放過程。也許還能用在微血管和單細胞層通透性研究。血漿蛋白不會結合FITC-Dextran。

本品是對平均分子量約70kDa葡聚糖進行標記的熒光素衍生物，即異硫氰酸熒光素葡聚糖70（fluorescein isothiocyanate dextran 70, FITC-dextran, FD70），以凍干粉形式提供，易溶于水，最大激發和發射波長分別為493和518nm。

產品特性

1）   CAS NO：60842-46-8

2）   化學名：Dextran(3′,6′dihydroxy-3-oxospiro(isobenzofuran-1(3H),9′-[9H]xanthen]-5(or 6)-yl)carbamothioate

, average Mw of approximately 70,000

3）   同義名：Fluorescein isothiocyanate-dextran 70; Fluoresceinyl thiocarbamoyl-dextran 70;

4）   分子量：average Mw 59,000-77,000

5）   置換率：0.002~0.008 mol FITC/glucose unit

6）   外觀：黃色至深橘色粉末

7）   溶解性：易溶于水或鹽溶液，也溶于DMSO，甲酰胺和某些其他極性有機溶劑，不溶于更低的脂肪醇、丙酮、氯仿和二甲基甲酰胺（DMF）

8）   光譜特性：Ex/Em=493/518nm【由于熒光素基團的電荷狀態依賴于緩沖液的pH和離子強度，因此熒光強度也會因這些參數的變化而變化。pH＞8觀察到最大熒光強度。生理緩沖液能顯著影響熒光強度，或得到增加或受到抑制。見附錄圖2. pH 4-9范圍內FITC-Dextran 70的熒光變化（Em=520nm）】

保存與運輸方法

保存：室溫避光短期保存，2-8℃避光長期保存，保持密封干燥，至少3年穩定。

運輸：室溫運輸。

產品穩定性

綜合各種溶液體系和溫度下FITC-Dextrans的穩定性測定，總的來說，體內外FITC-Dextrans的穩定性非常優秀。僅當pH＞9和上升溫度內熒光素可能存在水解的風險。兔血漿、肌肉勻漿液、肝臟勻漿液和尿液內的FITC-Dextrans在37℃，至少3天內保持穩定，分子量不會發生變化，且未發現熒光素基團的釋放。6%三氯乙酸內FITC-Dextrans室溫穩定保存3天。【文獻來源：P. Kurtzhals, C. Larsen and M. Johansen, High performance size-exclusion chromatographic procedure for the determination of fluoresceinyl isothiocyanate dextrans of various molecular masses in biological media. J Chromatogr, 491(1989), 117-127.】

硫代氨甲酰鍵的水解產生4-或5-氨基熒光素，能立即被HPLC定量檢測到。未發表的研究數據顯示，將高壓處理的FITC-Dextran 70溶液置于8-50℃長達5個月，發現僅在50℃情況下可能觀察到微量（1%）的自由氨基熒光素含量增加。單獨進行高壓處理會引起2.7%的自由氨基熒光素產生。

其他的未發表研究顯示，FITC-Dextran在pH4溶液35℃內能穩定保存高達1年。而在pH4，80℃內硫代氨甲酰鍵穩定30min，可能觀察到葡聚糖的降解。pH9，35℃內存放一個月以上會發生一定量（24%）的熒光衰減。

一些研究證明，FITC-Dextrans在持續性實驗（1-6天）的體內穩定性。【文獻來源：N. Thorball, FITC-dextran tracers in microcirculatory and permeability studies using combined fluorescence Stereo Microscopy, Fluorescence Stereo-microscopy and electron microscopy, Histochemistry, 71(1981), 209-233.】

注意事項

1）  FITC-Dextrans易溶于水或鹽溶液，可根據實際使用濃度配制適當濃度的母液。

2）  FITC-Dextrans溶液高壓滅菌可能導致少量氨基熒光素的釋放，若需要無菌，建議用過濾的方法來除菌。

3）  為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

附錄

圖1. FITC-Dextran分子片段的結構特征

圖2. pH 4-9范圍內FITC-Dextran 70的熒光變化（Em=520nm）