Trypsin, TPCK Treated, Cell Culture Grade 胰蛋白酶（TPCK處理）

產品描述

胰蛋白酶（胰酶，Trypsin），CAS：9002-07-7，來源于胰腺的一種絲氨酸蛋白酶，由223個氨基酸殘基組成的單鏈多肽，底物特異性是帶正電荷的賴氨酸和精氨酸側鏈。胰酶主要切割賴氨酸和精氨酸羧基端，當兩者之一緊隨為脯氨酸的情況除外。另外，當切割位點任一邊緊鄰酸性殘基，胰酶水解速率也會減緩。

胰蛋白酶（胰酶，Trypsin），以無活性的胰蛋白酶原（Trypsinogen）形式分泌于胰腺中，通過切割其末端六肽而得到活化，產生天然單鏈形式的β-胰酶（β-Trypsin），隨后進行有限的自發裂解產生具水解活性的α-Trypsin（由二硫鍵共價連接的二條肽鏈組成）。胰酶水解活性可被多種化合物所抑制，有1）來源于胰腺、大豆、青豆、蛋清的天然胰蛋白酶抑制劑；2）銀離子；3）有機磷化合物，如氟磷酸異丙酯DFP；4）特定蛋白酶抑制劑，如AEBSF、抗蛋白酶、抑肽酶、PMSF、TLCK等；

本品是來源于牛胰腺的胰蛋白酶，經N-(對甲苯磺酰基)-L-苯丙氨酰甲基氯酮（TPCK）預處理以抑制任何殘留的糜蛋白酶活性，具更高的胰蛋白酶活性。本品以凍干粉形式提供，比活力≥10,000 BAEE units/mg。

產品特性

1） EC NO：3.4.21.4

2） CAS NO：9002-07-7

3） 同義名：Trypsin, frombovine pancreas, TPCK Treated; 胰酶，來源于牛胰腺，TPCK處理；

4） 分子量：23.8 kDa

5） 外觀：類白色或微黃色結晶粉末

6） 溶解性：溶于1mM HCl（1mg/ml）

7） 比活力（胰蛋白酶）：≥10,000 BAEE units/mg

8） 比活力（糜蛋白酶）：≤0.1 BTEE units/mg

保存與運輸方法

保存：-20℃密封干燥保存，至少2年有效。

運輸：冰袋運輸。

使用方法

1. 產品溶解

儲存液制備：溶于1mM HCl（pH 3）配制母液，充分溶解，-20℃分裝凍存，至少穩定保存~1年。加入Ca2+（20mM）能延緩胰蛋白酶的自溶和維持胰蛋白酶在溶液內的穩定性。

穩定性：胰蛋白酶在2.0M尿素，2.0M鹽酸胍或0.1%（w/v）SDS維持絕大多數活性。在高pH（＞11）下不可逆變性，或添加三氯乙酸 （TCA，終濃度10%）沉淀樣品，或加入高濃度尿素（＞6.5M）變性。為了去除所有胰蛋白酶活性，在1%（w/v）SDS下于100℃至少加熱5min。

2. 產品用法

使用時，將儲存液稀釋在50mM NH4HCO3, pH 7.8或pH7~8的合適緩沖液內（根據具體用途來選擇稀釋緩沖液）。

注意事項

1）胰蛋白凍干粉產品常遇到的活性定義及其轉換，

1 BAEE Unit：在25℃，pH 7.6的條件下，以BAEE為底物，3.2 ml的反應體系中，A253吸光值每分鐘會發生0.001的變化即為一個酶活單位。

1TAME Unit： 在25℃，pH 8.2，0.001M Ca2+條件下，每分鐘水解1μmol p-toluenesulfonyl-L-arginine methyl ester（TAME）的用量。

1 USP Unit：在指定條件下，每分鐘引起吸光值發生0.003的變化的樣品活性。

1 TAME unit = 19.2 USP or NF units = 57.5 BAEE Unit

2）為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。