AF594（紅色） NHS酯 等同于Alexa Fluor 594

產品介紹

• 化學結構：AF594 NHS酯含有N-羥基琥珀酰亞胺（NHS）酯基團，可與蛋白質、抗體或其他生物分子的游離氨基（-NH?）反應，形成穩定的酰胺鍵，實現共價標記。
• 熒光特性：
  • 激發/發射波長：約590 nm / 617 nm（橙紅色熒光）。
  • 高亮度與光穩定性：相比傳統染料（如TRITC），AF594具有更高的量子產率和抗光漂白能力，適合長時間成像。
  • pH不敏感性：在較寬pH范圍內（4-10）保持穩定，適用于多種生物環境。
• 溶解性：通常溶于無水DMSO或DMF，便于實驗操作。
• 包裝規格：1 mg，需避光干燥保存（-20°C）。

生物應用

1. 1.

   免疫熒光標記：

   • 用于標記抗體、蛋白質或肽段，進行細胞或組織樣本的熒光染色，適用于共聚焦顯微鏡、寬場熒光顯微鏡等成像技術。
   • 常與綠色熒光染料（如FITC、Alexa Fluor 488）搭配，實現多色標記，減少串色干擾。
2. 2.

   流式細胞術：

   • 標記細胞表面抗原或胞內蛋白，用于細胞分選和分析，其橙紅色熒光易于與FITC（綠色）等區分。
3. 3.

   活細胞成像：

   • 由于低細胞毒性，可用于活細胞動態追蹤，如細胞器標記、受體定位等。
   • 結合共聚焦或超分辨顯微技術，實現高分辨率成像。
4. 4.

   核酸標記：

   • 通過氨基修飾的寡核苷酸或核酸類似物，標記DNA/RNA探針，用于原位雜交或熒光定量PCR。
5. 5.

   其他應用：

   • 生物傳感器構建、蛋白質相互作用研究（如FRET實驗中的供體/受體對）等。

使用注意事項

• 反應條件：標記反應需在弱堿性緩沖液（如pH 8.0-9.0）中進行，避免氨基質子化影響反應效率。
• 純化：標記后需通過透析或凝膠過濾去除未反應的染料，減少背景干擾。
• 儲存：干燥避光保存，避免反復凍融；工作液現配現用，避免長時間暴露于光照。

優勢總結

• 兼容性強：適用于多種生物樣本（細胞、組織、體液）。
• 多色實驗友好：與常見熒光顯微鏡濾光片匹配，適合多通道成像。
• 高靈敏度：低背景信號，適合低豐度靶標檢測。